超聲波是一種可控的細胞分裂手段,超聲波的機械效應可以更快更全面地滲透到細胞物質(zhì)中,提高物質(zhì)的傳遞。超聲波能使溶劑對植物組織有更大的滲透能力,并能改善傳質(zhì)。超聲空化破壞細胞壁,促進(jìn)基質(zhì)成分的釋放。在
超聲波粉碎機的強超聲波作用下,細胞或亞細胞中的酶或蛋白質(zhì)會(huì )因細胞分裂而釋放出來(lái)。細胞分裂是一個(gè)敏感的過(guò)程,因為細胞壁可以承受體內的高滲透壓,必須控制細胞分裂的力度,以避免釋放不需要的物質(zhì),包括細胞碎片和核酸,或變性。那我們在使用時(shí)需要注意些什么呢?
1、切勿空載,啟動(dòng)機器前,超聲波探頭必須插入樣品中。
2、超聲波探頭水深:1.5Cm左右,液面高度30mm以上。探頭應該居中,不要貼在墻上。超聲波是垂直縱波,插入過(guò)深不易形成對流,會(huì )影響粉碎效率。
3、超聲波參數設置:設置超聲波粉碎機的工作參數。對于對溫度要求敏感的樣品(如細菌),通常在室外使用冰浴。實(shí)際溫度必須在25度以下,蛋白質(zhì)核酸肯定不會(huì )變性。
?。?)時(shí)間:每次超聲波時(shí)間不要超過(guò)5秒,間隔時(shí)間要大于等于超聲波時(shí)間,以利于散熱。時(shí)間設置應以超聲時(shí)間短,超聲次數多為原則,這樣可以延長(cháng)超聲機和探頭的壽命。
?。?)超聲波功率:不能太高,以免樣品飛濺或起泡。如果樣品體積小于10ml,功率應在200w以?xún)?。選擇2mm的超聲波探頭,將面板后面的探頭選擇開(kāi)關(guān)撥到相應的檔位。10-200ml樣品體積的功率為200-400w,選擇6mm的超聲波探頭,將面板后面的喇叭打到相應的檔位;容量超過(guò)200ml的樣品,功率在300-600w之間。選擇一個(gè)10mm的超聲波探頭,將面板后面的喇叭打到相應的檔位。
?。?)容器選擇:選擇與樣品數量一樣大的燒杯,也有利于樣品在超聲中的對流,提高粉碎效率。
4、如果樣品放在1.5ml的EP管中,請務(wù)必固定EP管,防止冰浴融化后液面下降,導致無(wú)負載。
5、日常維護:超聲波粉碎機使用后,用酒精擦洗探頭或用清水進(jìn)行超聲。